分光光度计的使用方法(595nm蛋白质含量标准曲线)

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分光光度计的实际维护和使用

分光光度计

分光光度计是实验室中检测核酸或蛋白质样品浓度最常用的工具之一。仪器使用频繁,但很少有人维护。事实上,保持分光光度计清洁无污染是操作成功的关键。

清洁仪器

我们应该用蘸有中性洗涤剂的软布擦拭分光光度计的表面。刺激性清洁剂可能会损坏仪器表面。您也可以清洁比色皿本身。试管槽只能用蘸有乙醇或异丙醇的无绒棉签清洗。这可以防止液体进入内部。如果你必须用水清洗,用棉签蘸乙醇或异丙醇来加速干燥。

比色皿槽的盖子也可以清洗,但不要浸泡在洗涤剂中。如有必要,拆下盖子,用软布或蘸有温和清洁剂的无绒棉签清洁。此外,平时不使用时,应盖住比色皿槽,以防灰尘或其他污染物落入。

消毒净化

如果分光光度计被微生物所污染,那么可采用下列步骤进行消毒和净化。首先,利用温和的清洁剂来清洁设备。然后,用蘸有消毒剂(通常是酒精溶液)的软布擦拭表面。如有必要,拆下并清洁比色皿插槽。

检验组件

维护的另一方面在于检查分光光度计的光度准确性。Eppendorf提供了一个滤光片系统(BioSpectrometer reference filter kit),以评估光度准确性和系统的波长误差。试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息,也能提供精确度的信息,包括平均值和变异系数。

在测量准确性和精确度时,将空白滤光片和样品滤光片放入插槽内。将测得的输出吸光度值与允许值范围比较。在检查波长时,测定三个测试滤光片在对应波长(260 nm、280 nm和800 nm)下的吸光度,以确定每个波长的变异系数。

最后,很多分光光度计,包括Eppendorf的所有仪器,都有一个特殊的功能——自检。Eppendorf建议用户每周至少运行一次自测,但自动自测的频率可以根据需要进行设置。自检主要检查仪器的几个部分。它通过测量现有波长的随机误差来验证探测器,并通过检查最大能量、随机误差、参考传感器信号和光强来验证光源。最后,通过测量紫外光谱强度峰值位置的精度,确定波长的系统误差和随机误差。

按照这些建议保养分光光度计,以后就不用担心测量结果了。

(来源互联网组织

(图片Pixabay)