聚丙烯酰胺凝胶电泳(聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析)

聚丙烯酰胺凝胶电泳优缺点

冷泉港实验室的一组研究人员发现副流感嗜血杆菌具有两种限制酶活性，并试图通过离子交换色谱法分离酶。 为了找到一种快速检测色谱柱成分的方法，他们决定用低浓度的溴化乙锭对含有SV40 DNA片段的琼脂糖凝胶进行染色。他们很快意识到，可以将染料掺入凝胶和电泳缓冲液中，而不会影响线性DNA片段在凝胶中的迁移。 直到今天，他们在（Sharpetal。1973）论文中介绍的技术方法已经使用了，基本上没有变化。从1972年到1975年，当研究人员使用数量迅速增加的限制性核酸内切酶对感兴趣的DNA进行酶切作图时，琼脂糖凝胶的使用显着增加。

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

当时，将凝胶倒入玻璃移液器中，然后在带有自制电源的电泳槽中进行垂直电泳。在切割的凝胶瓶上分析DNA样品。第一个现代电泳仪由苏黎世的研究生Walter Schaffner发明。 由于认识到琼脂糖凝胶的电阻与周围的缓冲液基本相同，因此他构造了一个水平电泳槽以放置浸没的凝胶，该电泳槽可用于12个以上样品的电泳。沙夫纳将设备的设计分发给需要它的任何人，直到每个人都不再怀疑设备的性能为止。

聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤

装有小玻璃管的圆柱状凝胶很快被丢弃，新的浸入式凝胶今天仍在使用。从凝胶中纯化DNA是DNA片段亚克隆的关键步骤。多年来，已经发表了许多从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的方法。 这些方法中的许多方法在一定程度上可能是有效的，但并未被广泛采用，这表明这些方法缺乏有效性，可重复性和耐用性